目的 克隆基质金属蛋白酶(MMP)-2基因5′上游1.7 kb启动子,构建启动子-萤光素酶报告基因载体pGL3-MMP-2 pro,探讨缺氧诱导因子(HIF)-2α对MMP-2启动子转录活性的影响.方法 采用PCR扩增MMP-2启动子上游区域基因片段,插入到含有萤光素酶报告基因的载体PGL3-basic中构建重组子,经双酶切和测序鉴定后,将重组子转染MCF-7细胞,通过双萤光素酶活性分析HIF-2α对 MMP-2启动子转录活性的影响.结果 PCR扩增的1.7 kb片段经测序正确无误,pGL3-MMP-2 pro 转染 MCF-7细胞48 h 后,双萤光素酶活性测定结果显示加 CoCl2诱导的 pGL3-MMP-2 pro +HIF-2α组启动子活性显著高于pGL3-MMP-2 pro组、阴性对照组和空白对照组(均P<0.05).结论 HIF-2α促进了MMP-2启动子转录活性.
作者:李娜;梁文辉;史齐;王建强;王志慧
来源:中国老年学杂志 2017 年 37卷 24期