目的 探讨以重组质粒pcDNA3.1+-CD44(s1-s5)转染的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合培养后对乳腺癌干细胞(BCSC)的体外杀伤效应.方法 传代培养乳腺癌细胞株MDA-MB-231,构建重组质粒pET32a-CD44(s 1-s5)及pcDNA3.1+-CD44(s1-s5),前者转化感受态BL21后经原核系统表达,检测蛋白相对分子质量;后者通过化学转染法负载正常人外周血单个核细胞分离诱导的DC后,与同源诱导成熟的CIK细胞共同培养,以此为实验组[CD44(s1-s5)-DC-CIK组],并与对照组(载体质粒-DC-CIK组),即同样条件下以载体质粒pcDNA3.1+转染的DC与CIK共同培养,对体外微球体培养法富集的乳腺癌干细胞进行杀伤,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测各组的LDH释放值,计算细胞毒性百分比来对比两组效应细胞对靶细胞的杀伤效果.结果 重组质粒构建成功,并能通过原核及真核系统正常表达;经过6d的诱导培养,DC表面伸出大量突起,形态趋于成熟,CIK细胞始终呈单一圆球形悬浮生长,细胞数目较前明显增多.用LDH释放法检测在40:1、20:1、10:1、5:1 4种效靶比,在相同效靶比时,CD44(s1-s5)-DC-CIK组细胞杀伤活性(分别为33.45％±1.24％、25.43％±0.51％、16.07％±1.16％和9.40％±1.08％)明显高于载体质粒-DC-CIK组(分别为17.56％±0.71％、12.97％±0.36％

作者：冯青青；崔晓旭；庞华；孙雯雯；司玉玲

来源：中国慢性病预防与控制 2016 年 24卷 6期