目的：：探索以白细胞为免疫原的鼠抗人白细胞天然蛋白单克隆抗体( monoclonal antibodies,mAbs)制备与克隆筛选鉴定方法,制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,并鉴定抗体性质。方法：用健康人外周血白细胞免疫小鼠,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备mAbs,通过免疫细胞化学法对杂交瘤细胞进行非特异性阳性筛选,有限稀释法进行亚克隆,应用免疫沉淀-质谱法进行mAb特异性鉴定,通过Western blot进行细胞株筛选,小鼠体内诱生腹水法制备单抗,亲和层析法纯化, ELISA间接法测定效价及亲和力,Western blot进行特异性鉴定及交叉反应性分析,免疫组化染色人乳腺癌石蜡切片。结果：获得免疫细胞化学检测阳性多克隆细胞35孔,分泌鼠抗人S100A9蛋白单克隆抗体细胞株11株,优选1株制备腹水并纯化鉴定抗体,抗体效价为1∶3.18×105,亚类为IgG1,轻链为kappa链,抗体纯度达95
作者：米丹阳；段睿；宋军营；孙向东；张钟允；闫敏；袁永；张振强；张改平；刘文第
来源：中国免疫学杂志 2016 年 32卷 10期
