目的:获得能应用于临床诊断以及阻断PD-L1与PD-1结合的抗人PD-L1单克隆抗体.方法:采用重组表达的人PD-L1蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术获得稳定分泌抗人PD-L1单抗的阳性细胞株,ELISA方法鉴定抗体的特异性、亲和力、亚型等方面特性;免疫印迹、间接免疫荧光方法对肿瘤细胞进行检测;肿瘤杀伤实验验证抗体阻断活性.结果:共获得2株抗人PD-L1单抗,抗体效价分别为1∶2.56×106和1∶3×105,亲和力分别为1.5×109 L/mol和2.5x108 I/mol,均与PD-L2蛋白无交叉反应.免疫印迹、间接免疫荧光证实抗体有诊断作用.杀伤实验显示抗体有阻断作用.结论:共获得两株稳定分泌高效价、高特异性的抗人PD-L1单抗的杂交瘤细胞株,能作为诊断抗体应用于肿瘤表型检测和预后有效性的评估.抗体的阻断功能可应用于联合CIK细胞免疫治疗.
作者：冯沛然；黄建芳；王敏珍；廖伟聪；郝代玲；向军俭
来源：中国免疫学杂志 2017 年 33卷 6期
