目的:探讨抗增殖蛋白(PHB)对高糖诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响以及机制研究.方法:选取pCDNA3-PHB、pCDNA3-NC重组质粒转染和高糖干预心肌细胞,实验分为4组:正常对照组(Control组)、高糖刺激组(HG组)、高糖+空载体组(HG+pCDNA3-NC组)、高糖加pCDNA3-PHB重组质粒组(HG+pCDNA3-PHB);Western blot检测细胞转染后各组细胞中PHB蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)/B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、剪切的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(c-caspase3)、蛋白激酶B(AKt)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKt)蛋白的表达量,二氢乙啶(DHE)染色法检测高糖环境下心肌细胞内的活性氧(ROS)水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中TNF-αmRNA和IL-6 mRNA含量的测定,流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:pCDNA3-PHB重组质粒可使PHB表达量增加;与Control组相比,HG组、HG+pCDNA3-NC组、HG+pCDNA3-PHB组细胞凋亡率显著增高(P<0.05);与HG组相比,HG+pCDNA3-NC组细胞凋亡率变化不显著(P>0.05);HG+pCDNA3-PHB组细胞凋亡率明显降低(P<0.05).与Control组相比,HG组、HG+pCDNA3-NC组、HG+pCDNA3-PHB组细胞内ROS的水平、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、Bax/Bcl-2的相对表达量、c-caspase3(P<0.05)蛋白相对表达量显著增高;与HG组相比,HG+pCDNA3-NC组细
作者:李蕊
来源:中国免疫学杂志 2017 年 33卷 12期