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目的:探究miR-144与磷脂酰肌醇-3肌酶催化亚基δ(PIK3CD)的靶向关系及其影响结直肠癌(CRC)细胞增殖和免疫功能的作用机制.方法:RT-qPCR和Western blot检测CRC肿瘤组织以及HCT116细胞中miR-144和PIK3CD表达水平的变化.miRcode在线预测miR-144和PIK3CD的靶向关系,使用双荧光素酶实验进行验证.将miR-144模拟物、抑制剂和PIK3CD siRNA分别转染至HCT116细胞后,RT-qPCR和Western blot检测miR-144以及PIK3CD mRNA和蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力的变化,ELISA法检测TNF-α和sIL-2R表达水平的变化.结果:在CRC肿瘤组织和HCT116细胞中,miR-144表达下调,PIK3CD表达上调.PIK3CD siRNA和miR-144模拟物能够促使PIK3CD mRNA和蛋白表达下调,抑制HCT116细胞增殖,同时促进TNF-α和sIL-2R表达下调;miR-144抑制剂作用与之相反.结论:miR-144通过靶向PIK3CD基因抑制HCT116细胞增殖及其免疫功能.

作者:陈红跃;杨萌萌;张小路;段铮

来源:中国免疫学杂志 2019 年 35卷 10期

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作者:
陈红跃;杨萌萌;张小路;段铮
来源:
中国免疫学杂志 2019 年 35卷 10期
标签:
miR-144 PIK3CD 结肠直肠癌 增殖 免疫
目的:探究miR-144与磷脂酰肌醇-3肌酶催化亚基δ(PIK3CD)的靶向关系及其影响结直肠癌(CRC)细胞增殖和免疫功能的作用机制.方法:RT-qPCR和Western blot检测CRC肿瘤组织以及HCT116细胞中miR-144和PIK3CD表达水平的变化.miRcode在线预测miR-144和PIK3CD的靶向关系,使用双荧光素酶实验进行验证.将miR-144模拟物、抑制剂和PIK3CD siRNA分别转染至HCT116细胞后,RT-qPCR和Western blot检测miR-144以及PIK3CD mRNA和蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖能力的变化,ELISA法检测TNF-α和sIL-2R表达水平的变化.结果:在CRC肿瘤组织和HCT116细胞中,miR-144表达下调,PIK3CD表达上调.PIK3CD siRNA和miR-144模拟物能够促使PIK3CD mRNA和蛋白表达下调,抑制HCT116细胞增殖,同时促进TNF-α和sIL-2R表达下调;miR-144抑制剂作用与之相反.结论:miR-144通过靶向PIK3CD基因抑制HCT116细胞增殖及其免疫功能.