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目的:探讨微小RNA-1294(miR-1294)对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR与Western blot分别检测葡萄膜黑色素瘤组织、癌旁组织、葡萄膜黑色素瘤细胞系与正常葡萄膜上皮细胞系中miR-1294、三结构域蛋白28(TRIM28)的表达.葡萄膜黑色素瘤SP6.5细胞作为研究对象,在细胞中分别转染miR-NC、miR-1294 mimics、si-NC、si-TRIM28,分别记作miR-NC组、miR-1294组、si-NC组、si-TRIM28组;miR-1294 mimics、pcDNA、miR-1294 mim?ics与pcDNA-TRIM28分别共转染至SP6.5细胞,分别记作miR-1294+pcDNA组、miR-1294+pcDNA-TRIM28组.MTT法检测细胞增殖情况;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭.StarBase预测miR-1294的靶基因,双荧光素酶报告实验鉴定靶基因,Western blot法检测靶基因的蛋白表达.Western blot法检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、p21、p27、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-14(MMP-14)的蛋白表达.结果:miR-1294在葡萄膜黑色素瘤组织及其细胞系中的表达水平明显降低(P<0.05),TRIM28在葡萄膜黑色素瘤组织及其细胞系中的表达水平明显升高(P<0.05);miR-NC组、miR-1294组间细胞活力、迁移细胞数目与侵袭细胞数目总体比较,差异均有统计学意义(P<0.05)

作者:王光进;何林波;冯小梅

来源:中国免疫学杂志 2021 年 37卷 8期

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作者:
王光进;何林波;冯小梅
来源:
中国免疫学杂志 2021 年 37卷 8期
标签:
miR-1294 TRIM28 葡萄膜黑色素瘤 增殖 迁移 侵袭
目的:探讨微小RNA-1294(miR-1294)对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR与Western blot分别检测葡萄膜黑色素瘤组织、癌旁组织、葡萄膜黑色素瘤细胞系与正常葡萄膜上皮细胞系中miR-1294、三结构域蛋白28(TRIM28)的表达.葡萄膜黑色素瘤SP6.5细胞作为研究对象,在细胞中分别转染miR-NC、miR-1294 mimics、si-NC、si-TRIM28,分别记作miR-NC组、miR-1294组、si-NC组、si-TRIM28组;miR-1294 mimics、pcDNA、miR-1294 mim?ics与pcDNA-TRIM28分别共转染至SP6.5细胞,分别记作miR-1294+pcDNA组、miR-1294+pcDNA-TRIM28组.MTT法检测细胞增殖情况;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭.StarBase预测miR-1294的靶基因,双荧光素酶报告实验鉴定靶基因,Western blot法检测靶基因的蛋白表达.Western blot法检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、p21、p27、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-14(MMP-14)的蛋白表达.结果:miR-1294在葡萄膜黑色素瘤组织及其细胞系中的表达水平明显降低(P<0.05),TRIM28在葡萄膜黑色素瘤组织及其细胞系中的表达水平明显升高(P<0.05);miR-NC组、miR-1294组间细胞活力、迁移细胞数目与侵袭细胞数目总体比较,差异均有统计学意义(P<0.05)