目的:探讨沉默RalBP1对口腔癌细胞CAL27增殖、凋亡、侵袭、间质转化及炎症因子水平的影响.方法:CAL27细胞分别转染3个不同序列(RalBP1-shRNA1、RalBP1-shRNA2及RalBP1-shRNA3),RT-PCR检测RalBP1 mRNA表达,Western blot检测RalBP1蛋白表达,筛选最佳沉默序列进行后续实验;Western blot检测增殖相关蛋白的表达;EdU检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;Western blot检测间质转化标志物表达;ELISA检测炎症因子含量;RT-PCR检测炎症因子mRNA表达.结果:与shRNA-NC组相比,RalBP1-shRNA1组RalBP1 mRNA及蛋白表达降低最为显著,因此后续实验选用RalBP1-shRNA1组作为沉默组;与shRNA-NC组相比,Ki67、Survivin表达降低,p21表达升高,EdU染色阳性细胞数显著减少,凋亡率显著升高,侵袭细胞数显著减少,划痕闭合率显著降低,VEGF、N-cad、FN表达显著降低,IL-6、IL-1β、iNOS含量及相应mRNA表达显著降低.结论:沉默RalBP1可抑制口腔癌细胞CAL27增殖、侵袭、间质转化,促进其凋亡,改善炎症因子释放,抑制口腔癌发生发展.
作者:毕磊;贺钊;武燃;刘辉;陈晖
来源:中国免疫学杂志 2022 年 38卷 9期