目的研究白细胞介素18(Interleukin-18,IL18)基因能否在宫颈癌细胞(Hela细胞)中表达.方法从人胎脑RNA中RT-PCR扩增IL-18基因,构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18,并转染到宫颈癌细胞中,收集细胞转染后24～48h上清,Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的短暂表达.G418筛选稳定表达IL18基因的单克隆宫颈癌细胞,利用RT-PCR、Western-Blotting检测IL18基因在宫颈癌细胞中的稳定表达.研究为三组:1.空白Hela细胞组;2.空载体pcDNA3.1(+)转染Hela细胞组;3.pcDNA3.1(+)-IL18传染Hela细胞组.结果1.成功克隆IL18基因.2.成功构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18.3.短暂表达结果:Western-Blotting检测pcDNA3.1(+)-IL18组在14.4至20.1KDa之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有任何条带.4.稳定表达检测结果:(1)RT-PCR结果:pcDNA3.1(+)-IL18组扩增到一特异性DNA条带,位于750至1000bp之间,空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有扩增到任何条带.(2)Western-Blotting结果:pcDNA3.1(+)-IL18组在14.4至20.1KD之间有一特异性条带(18.3KDa),空白Hela细胞组和空载体pcDNA3.1(+)组均没有任何条带.结论1.成功克隆IL18基因并构建真核基因表达载体pcDNA3.1(+)-IL18.2.IL18基因成

作者：包珊；杨舒盈；符生苗；姚书忠

来源：中国热带医学 2003 年 3卷 5期