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目的 对结核分枝杆菌Mtb81抗原基因进行克隆、表达及纯化,并评价其抗原性.方法 应用聚合酶链反应技术扩增结核分枝杆菌 H37Rv Mtb81 DNA序列;将目的基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;经SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析.结果 获得了结核分枝杆菌抗原Mtb81基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗结核分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为:35.8

作者:杨柳;苏明权;马越云;岳乔红;郝晓柯

来源:中国热带医学 2010 年 10卷 3期

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作者:
杨柳;苏明权;马越云;岳乔红;郝晓柯
来源:
中国热带医学 2010 年 10卷 3期
标签:
结核分枝杆菌 抗原 Mtb81 蛋白 基因表达
目的 对结核分枝杆菌Mtb81抗原基因进行克隆、表达及纯化,并评价其抗原性.方法 应用聚合酶链反应技术扩增结核分枝杆菌 H37Rv Mtb81 DNA序列;将目的基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;经SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析.结果 获得了结核分枝杆菌抗原Mtb81基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗结核分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为:35.8