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目的 对结核分枝杆菌14 000抗原基因进行克隆表达及纯化,并评价其抗原性.方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR方法 获得目的 基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;进SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析.结果 获得了结核分枝杆菌抗原14 kD基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果 证实该重组蛋白能与抗结核分枝杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为: 52.5

作者:杨柳;苏明权;岳乔红;程晓东;马越云;郝晓柯

来源:中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 9期

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作者:
杨柳;苏明权;岳乔红;程晓东;马越云;郝晓柯
来源:
中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 9期
标签:
结核分枝杆菌 抗原 14000蛋白 基因表达
目的 对结核分枝杆菌14 000抗原基因进行克隆表达及纯化,并评价其抗原性.方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR方法 获得目的 基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;进SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析.结果 获得了结核分枝杆菌抗原14 kD基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果 证实该重组蛋白能与抗结核分枝杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为: 52.5