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目的 探讨未经诱导的胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)移植对SD大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)神经功能恢复的影响.方法 取受孕昆明系小鼠的囊胚进行胚胎干细胞的提取、建系,以流式细胞仪测试阶段特异性胚胎干细胞表面抗原(stage-specific embryonic antigens 1,SSEA-1),进行干性鉴定并进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)染色示踪.将30只SD大鼠制备为T10脊髓损伤模型,将存活的26只大鼠随机分为对照组(A组,8只),只行脊髓损伤手术而不行特殊治疗;生理盐水治疗组(B组,9只),于损伤区域局部注射20 μL生理盐水;细胞治疗组(C组,9只),于损伤区域局部注射20μL标记好的ESCs,总细胞数为2×106个.术后1、2、3、4、5、6周采用BBB后肢运动功能评分观察大鼠神经功能恢复情况,并在第6周取损伤脊髓行病理组织HE染色和免疫组织化学染色观察.结果 ESCs经体外培养,呈典型的“鸟巢”状生长,碱性磷酸酶(alkaline-phosphatase,AKP)染色阳性,SSEA-1表达阳性,并成功标记上5-BrdU.大鼠实验,BBB运动功能评分显示脊髓损伤开始0~1周内,三组大鼠运动功能恢复情况差别无统计学意义(P>0.05).第2~6周,C组与A、B组比较差异有统计学意义(P<0.05).HE染色观察:三组皆有损伤区域内空洞形成及局部细胞坏死,

作者:徐进;郑璟;曹玉华;刘韬;朱肖奇

来源:中国热带医学 2015 年 15卷 9期

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作者:
徐进;郑璟;曹玉华;刘韬;朱肖奇
来源:
中国热带医学 2015 年 15卷 9期
标签:
胚胎干细胞 脊髓损伤 移植 功能恢复 Embryonic stem cell Spinal cord injury Transplantation Functional recovery
目的 探讨未经诱导的胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)移植对SD大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)神经功能恢复的影响.方法 取受孕昆明系小鼠的囊胚进行胚胎干细胞的提取、建系,以流式细胞仪测试阶段特异性胚胎干细胞表面抗原(stage-specific embryonic antigens 1,SSEA-1),进行干性鉴定并进行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine,5-BrdU)染色示踪.将30只SD大鼠制备为T10脊髓损伤模型,将存活的26只大鼠随机分为对照组(A组,8只),只行脊髓损伤手术而不行特殊治疗;生理盐水治疗组(B组,9只),于损伤区域局部注射20 μL生理盐水;细胞治疗组(C组,9只),于损伤区域局部注射20μL标记好的ESCs,总细胞数为2×106个.术后1、2、3、4、5、6周采用BBB后肢运动功能评分观察大鼠神经功能恢复情况,并在第6周取损伤脊髓行病理组织HE染色和免疫组织化学染色观察.结果 ESCs经体外培养,呈典型的“鸟巢”状生长,碱性磷酸酶(alkaline-phosphatase,AKP)染色阳性,SSEA-1表达阳性,并成功标记上5-BrdU.大鼠实验,BBB运动功能评分显示脊髓损伤开始0~1周内,三组大鼠运动功能恢复情况差别无统计学意义(P>0.05).第2~6周,C组与A、B组比较差异有统计学意义(P<0.05).HE染色观察:三组皆有损伤区域内空洞形成及局部细胞坏死,