本文构建了含分枝杆菌抗原Ag85B(30kDa),MPT-83(26kDa)和ESAT-6(6kDa)分泌蛋白的真核表达载体pJW4303,酶切鉴定和序列分析,确定含有正确的读码框.重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达,证明上述三种重组质粒能在COS7细胞中表达出特异蛋白.三种重组表达质粒同时肌注免疫小鼠,首免,二免和三免小鼠后21dAg85B抗体平均滴度分别为1:3200,1:51200和1:102400,MPT-83抗体平均滴度二次免疫和三次免疫后21d测得为1:25和1:50,三次免疫后均未检测到ESAT-6特异性抗体.在三免后21dAg85B和MPT-83的特异性细胞因子γ-干扰素的浓度分别275pg/ml±16.5,220 pg/ml±19.8;而ESAT-6的γ-干扰素浓度为220 pg/ml±9.9.本研究表明,多价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对抗结核病的抗性.
作者：蔡宏；田霞；李淑霞；胡勤；朱玉贤
来源：中国人兽共患病杂志 2003 年 19卷 5期
