目的构建以结核分枝杆菌H37Rv esat-6基因为基础的基因疫苗,并研究其免疫原性.方法采用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切含有esat-6目的基因的质粒pGEM-Teasy-esat6,10g.L-1琼脂糖凝胶电泳回收约300 bp大小片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1的相应酶切位点阳性克隆经酶切鉴定证实.重组表达质粒肌注免疫BALB/c小鼠三次,每次间隔2周,ELISA检测小鼠血清中产生抗体的水平.结果用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切鉴定证实目的基因正确插入载体,命名为pcDE6,重组质粒免疫小鼠体内产生特异性抗体.结论所构建的重组真核表达质粒pcDE6能引起免疫动物的特异性体液免疫反应,应进一步研究其刺激机体的细胞免疫应答,以用于结核病(TB)的防治研究.
作者：王丽梅；范雄林；师长宏；李元；柏银兰；薛莹；徐志凯
来源：中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 5期
