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目的 对浙江省肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,HFRS)疫区-龙泉,新分离到的毒株的S基因片段进行克隆并进行序列测定及分析,以确定毒株的型别和基因变异程度,为进一步研究病毒进化和变异提供了有利条件.方法 采用直接免疫荧光检测疫区鼠肺HV抗原.将HV抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞,分离病毒.参考GenBank 发表的汉坦病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,提取分离株细胞培养物的总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增新毒株S片段基因,并克隆入载体,纯化后进行核苷酸序列测定及分析.结果 成功分离到的新毒株S片段的全基因序列共 1 700个核苷酸,只有一个开放读码框架,共编码 429 个氨基酸.新毒株与HTN型毒株比较,核苷酸同源率为85.7

作者:徐芳;姚苹苹;朱函坪;谢荣辉

来源:中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 7期

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作者:
徐芳;姚苹苹;朱函坪;谢荣辉
来源:
中国人兽共患病学报 2009 年 25卷 7期
标签:
汉坦病毒 病毒分离 S片段 序列分析 Hantavirus isolation S segment sequence analysis
目的 对浙江省肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,HFRS)疫区-龙泉,新分离到的毒株的S基因片段进行克隆并进行序列测定及分析,以确定毒株的型别和基因变异程度,为进一步研究病毒进化和变异提供了有利条件.方法 采用直接免疫荧光检测疫区鼠肺HV抗原.将HV抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞,分离病毒.参考GenBank 发表的汉坦病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,提取分离株细胞培养物的总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增新毒株S片段基因,并克隆入载体,纯化后进行核苷酸序列测定及分析.结果 成功分离到的新毒株S片段的全基因序列共 1 700个核苷酸,只有一个开放读码框架,共编码 429 个氨基酸.新毒株与HTN型毒株比较,核苷酸同源率为85.7