目的 克隆中国间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)编码区全长基因,并对其进行生物信息学分析.方法 自间日疟原虫抽提RNA,根据已知的PvLDH基因设计特异性引物,采用RT-PCR扩增PvLDH编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定,利用生物信息学在线工具对序列进行分析并做B细胞表位预测.结果 PCR 产物电泳结果显示所克隆的基因为951bp,基因测序结果与GenBank 报道的基因序列有一个碱基差异,但编码氨基酸无差异.在线分析预测出12个B细胞表位,与恶性疟原虫乳酸脱氢酶预测表位对比分析,发现一个PvLDH特异性表位.结论 成功克隆了我国间日疟原虫乳酸脱氢酶编码区全长基因,并预测出1个PvLDH特异性线性B细胞表位.
作者:方强;夏惠;王雪梅;齐文娟;常雪莲;高琪
来源:中国人兽共患病学报 2010 年 26卷 6期