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目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞(RAW264.7细胞)后,Toll样受体3 (TLR3)的水平变化及其介导产生的I型干扰素的抗病毒作用.方法 RSV感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,并给予TLR3特异性抗体处理,分别于感染的4、8、12、16和24 h后收集各组细胞.以未感染病毒的细胞为对照组.用Trizol提取细胞总RNA,半定量RT-PCR法检测TLR3、干扰素α(IFN-α),干扰素β(IFN-β),RSV F蛋白的mRNA表达量变化.结果 (1)RSV感染RAW264.7细胞后,TLR3、IFN-α、IFN-β、RSV F蛋白的mRNA表达量均升高且有时间依赖性,TLR3 mRNA 24 h表达量是基础表达量的6倍多,IFN-α,IFN-β mRNA 24 h表达量是基础表达量的4倍多,RSV F蛋白mRNA是基础表达量的近1.8倍.(2)预先给予TLR3抗体处理以抑制TLR3受体后,再行RSV感染,IFN-α和IFN-β的mRNA表达量虽有升高,但较感染组相比均有下降,mRNA表达在12 h后显著降低,且IFN-β的mRNA表达量下调更明显.但RSV F基因的mRNA表达在12 h后升高有统计学差异,24 h升高有显著性差异.结论 RSV感染RAW264.7巨噬细胞后可上调TLR3表达,其活化细胞介导产生的I型干扰素起抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平.

作者:史晓佾;黄升海

来源:中国人兽共患病学报 2010 年 26卷 6期

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作者:
史晓佾;黄升海
来源:
中国人兽共患病学报 2010 年 26卷 6期
标签:
呼吸道合胞病毒 Toll样受体3 I型干扰素 巨噬细胞
目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染巨噬细胞(RAW264.7细胞)后,Toll样受体3 (TLR3)的水平变化及其介导产生的I型干扰素的抗病毒作用.方法 RSV感染体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,并给予TLR3特异性抗体处理,分别于感染的4、8、12、16和24 h后收集各组细胞.以未感染病毒的细胞为对照组.用Trizol提取细胞总RNA,半定量RT-PCR法检测TLR3、干扰素α(IFN-α),干扰素β(IFN-β),RSV F蛋白的mRNA表达量变化.结果 (1)RSV感染RAW264.7细胞后,TLR3、IFN-α、IFN-β、RSV F蛋白的mRNA表达量均升高且有时间依赖性,TLR3 mRNA 24 h表达量是基础表达量的6倍多,IFN-α,IFN-β mRNA 24 h表达量是基础表达量的4倍多,RSV F蛋白mRNA是基础表达量的近1.8倍.(2)预先给予TLR3抗体处理以抑制TLR3受体后,再行RSV感染,IFN-α和IFN-β的mRNA表达量虽有升高,但较感染组相比均有下降,mRNA表达在12 h后显著降低,且IFN-β的mRNA表达量下调更明显.但RSV F基因的mRNA表达在12 h后升高有统计学差异,24 h升高有显著性差异.结论 RSV感染RAW264.7巨噬细胞后可上调TLR3表达,其活化细胞介导产生的I型干扰素起抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平.