目的 建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础.方法 摸索类鼻疽伯克霍尔德氏菌培养条件、构建模型的感染条件(e.g.感染复数,感染时间),通过吉姆萨染色、透射电镜、活细胞工作站动态观察等确证胞内感染和宿主细胞的形态变化,分析病原菌侵袭率、胞内复制率和宿主反应性来评价该模型中病原菌侵入RAW264.7特点和病理损伤类型.结果 确定了类鼻疽伯克霍尔德氏菌的一般培养条件,感染复数MOI=100感染宿主细胞,170 g离心5 min后37℃共孵1 h以利于细菌侵入胞内,含250 μg/ml卡那霉素的DMEM-10培养以杀死胞外病原菌.形态观察,类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染后最早8 h可观察到异物多核巨细胞(MNGC),RAW264.7细胞伸出伪足,相互融合.感染初期(<3 h)TNF-α升高较快,9 h后则下降至低值,直至感染后期(15~24 h)再次升高.结论成功构建类鼻疽伯克霍尔德氏菌胞内感染模型,拟为进一步研究其致病机制提供了条件.
作者：方瑶；潘静；李倩；顾江；唐彬；张卫军；毛旭虎
来源：中国人兽共患病学报 2013 年 29卷 3期
