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目的:预测和鉴定梅毒螺旋体(Tp)膜蛋白TprF氨基端保守区(TprFN )的优势B细胞表位,为深入研究梅毒多价表位疫苗提供依据。方法从GenBank获取T prFN的氨基酸序列,采用M obyle、ABCpred和IEDB在线软件综合分析预测TprFN的B细胞表位并人工合成多肽;表达重组蛋白 TprFN并经Western blot鉴定后免疫兔,获取血清并测定抗体效价;以TprFN免疫兔血清、梅毒患者血清(设正常人血清和正常兔血清为阴性对照),间接ELISA测定预测的7条人工合成的B细胞表位多肽的免疫反应性和特异性。结果软件综合预测 TprFN的 P1(43‐62AA)、P2(57‐71AA)、P3(81‐88AA)、P4(89‐103AA)、P5(125‐138AA)、P6(231‐251AA)、P7(268‐279AA)可能为B细胞表位;表达一可溶性蛋白,WB鉴定为目的蛋白,其免疫抗体效价为1∶12800以上;ELISA结果显示,预测表位P1、P3与TprFN免疫兔血清及梅毒患者血清均呈阳性反应,而与对照血清均不反应。结论 P1、P3为T prF潜在的优势B细胞表位。

作者:曹龙古;凌晖;蔡恒玲;赵飞骏;欧阳丹明;陈苏芳;吴移谋;曾铁兵

来源:中国人兽共患病学报 2015 年 10期

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作者:
曹龙古;凌晖;蔡恒玲;赵飞骏;欧阳丹明;陈苏芳;吴移谋;曾铁兵
来源:
中国人兽共患病学报 2015 年 10期
标签:
梅毒螺旋体 T pF B细胞表位 Treponema pallidum TprF B-cell epitope
目的:预测和鉴定梅毒螺旋体(Tp)膜蛋白TprF氨基端保守区(TprFN )的优势B细胞表位,为深入研究梅毒多价表位疫苗提供依据。方法从GenBank获取T prFN的氨基酸序列,采用M obyle、ABCpred和IEDB在线软件综合分析预测TprFN的B细胞表位并人工合成多肽;表达重组蛋白 TprFN并经Western blot鉴定后免疫兔,获取血清并测定抗体效价;以TprFN免疫兔血清、梅毒患者血清(设正常人血清和正常兔血清为阴性对照),间接ELISA测定预测的7条人工合成的B细胞表位多肽的免疫反应性和特异性。结果软件综合预测 TprFN的 P1(43‐62AA)、P2(57‐71AA)、P3(81‐88AA)、P4(89‐103AA)、P5(125‐138AA)、P6(231‐251AA)、P7(268‐279AA)可能为B细胞表位;表达一可溶性蛋白,WB鉴定为目的蛋白,其免疫抗体效价为1∶12800以上;ELISA结果显示,预测表位P1、P3与TprFN免疫兔血清及梅毒患者血清均呈阳性反应,而与对照血清均不反应。结论 P1、P3为T prF潜在的优势B细胞表位。