目的 制备并评价产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)标准物质.方法 分别用基质辅助激光解吸电离(MALDI-TOFMS)、生化、16 s RNA基因序列测定三种方法确认菌株种属.采用冷冻干燥技术制备600个ETEC标准样品(103 CFU/样品);从中随机抽取20个进行均匀性检验;模拟25℃和37℃的运输温度测试样品的运输稳定性,同时在4℃和-20℃的条件下进行保藏稳定性检验.组织3家实验室对样品进行协同验证.最后选择20件食品基质来验证样品的使用效果.结果 生化、MALDI-TOF MS、16 s RNA基因序列鉴定CMCC(B)43208为大肠埃希氏菌,lt、stp、sth基因确认其为ETEC.均匀性检验中,单因素方差分析得F=1.48,小于FINV(O.05,19,20).稳定性检验中,在25℃和37℃保藏7 d后结果为103CFU/样品,在-20℃保藏60 d和4℃保存28 d后结果为103CFU/样品.协同标定实验中,3家实验室检测样品中菌株均为ETEC(103 CFU/标准样品).使用效果评价中,ETEC标准样品加入20种食品基质后均可检出,而本底对照均未检出.结论 本实验制备的ETEC标准样品均匀且稳定,协同验证、食品基质验证实验结果均与预期设置的103CFU/样品一致,可以作为标准物质使用.
作者:刘娜;王亚萍;赵琳娜;王学硕;崔生辉
来源:中国食品卫生杂志 2022 年 34卷 2期