用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡，探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径.将特异性切割Bcl-2 mRNA的核酶克隆至含MTⅡ启动子并可为ZnSO4S04诱导表达的真核表达载体中，通过脂质体转入食管癌鳞状上皮细胞系Eca 109中，经G418筛选得到稳定抗性细胞株X109R，挑取单细胞株扩大培养，140μmol/L ZnSO4诱导3 d，用Northern-blot、免疫荧光、流式细胞仪鉴定核酶及Bcl-2蛋白表达情况，用TUNEL标记及流式细胞术检测凋亡细胞的比例.bcl-2核酶在不同单细胞株中有不同程度的表达，其中一株X109R14表达最高.测定其中Ecl-2蛋白含量，发现Bcl-2蛋白表达大为降低.加入紫杉醇后，TUNEL标记及凋亡峰测定结果都表明同一条件下凋亡率升高.结果提示，转入特异性切割bcl-2mRNA的核酶可有效地阻断Bcl-2蛋白合成.Bcl-2蛋白表达降低可明显促进紫杉醇诱导的细胞凋亡.说明Bcl-2蛋白在细胞产生耐药过程中起着重要作用.
作者：彭玮丹；张杰；赵永同；惠宏襄；朱峰；杨安钢；王成济
来源：中国生物化学与分子生物学报 2000 年 16卷 2期
