目的建立丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位基因的真核表达载体,并在COS7细胞中瞬时表达.方法用PCR方法扩增核心区羧基端部分缺失的基因片段;分别合成HCV E2区模拟表位和NS3~NS5 7个T或Th细胞表位基因;PCR方法将羧基端部分缺失的HCV核心区基因与合成的表位基因串联,克隆人真核表达载体pcDNA3.1(-),并通过脂质体瞬时转染COS7细胞.结果所构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm已成功转染COS7,间接免疫荧光和RT-PCR证实,pcDNA3.1(-)-CtEm可在COS7中表达复合多表位基因.结论已成功构建HCV复合多表位基因的真核表达载体,并在COS7细胞中瞬时表达,为进一步复合多表位的基因免疫奠定基础.
作者:韦三华;尹文;雷迎峰;胡兴斌;吕欣;杨敬;孙梦宁;徐志凯
来源:中国生物制品学杂志 2006 年 19卷 1期