目的构建人胰岛素的植物细胞表达载体.方法设计多对引物,通过PCR反应合成霍乱毒素B亚单位(CTB)基因和不带C肽的人胰岛素基因.将霍乱毒素B亚单位(CTB)基因与这种不带C肽的人胰岛素基因融合后,插入克隆载体,然后用BamH Ⅰ和Sac Ⅰ进行酶切,并将酶切的融合基因片段连接在植物表达载体pBI121上,最后用BamH Ⅰ和Sac Ⅰ进行酶切鉴定.结果测序结果表明,PCR扩增的目的基因顺序与设计完全一致,并构建了克隆载体和植物表达载体.植物表达载体经酶切后鉴定,所含基因片段大小与预期相符.结论已成功地构建了人胰岛素基因的植物细胞表达载体.
作者:汪春义;戚凤春;陈桂玲;申镇维;王宣军;盛军
来源:中国生物制品学杂志 2006 年 19卷 4期