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目的 克隆并表达梅毒螺旋体外膜蛋白TP0684,为研制早期诊断试剂盒提供依据.方法 PCR法扩增TP0684编码基因.T-A克隆后构建表达质粒pET-22b(+)-TP0684,经酶切鉴定后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定.结果 PCR法扩增出了1 212 bp的目的 片段,原核表达质粒pET-22b(+)-TP0684酶切鉴定正确,测序结果与GenBank上公布的该基因的CDS序列完全一致.转化E.coli BL21(DE3)后,IPTG诱导目的 蛋白表达率为25

作者:肖洁;郭刚;曾明;邹全明;钟情;张卫军

来源:中国生物制品学杂志 2007 年 20卷 4期

知识库介绍

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作者:
肖洁;郭刚;曾明;邹全明;钟情;张卫军
来源:
中国生物制品学杂志 2007 年 20卷 4期
标签:
梅毒密螺旋体 外膜蛋白 基因克隆 表达
目的 克隆并表达梅毒螺旋体外膜蛋白TP0684,为研制早期诊断试剂盒提供依据.方法 PCR法扩增TP0684编码基因.T-A克隆后构建表达质粒pET-22b(+)-TP0684,经酶切鉴定后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定.结果 PCR法扩增出了1 212 bp的目的 片段,原核表达质粒pET-22b(+)-TP0684酶切鉴定正确,测序结果与GenBank上公布的该基因的CDS序列完全一致.转化E.coli BL21(DE3)后,IPTG诱导目的 蛋白表达率为25