目的 在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体(Tp)TpN47(68~410 aa)重组蛋白.方法 采用PCR法从Tp全基因组中扩增TpN47(202~1230 bp)片段,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22 b(+)-TpN47,经酶切鉴定后转化E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化,Western blot鉴定其免疫反应性.结果 PCR法扩增出约1 000 bp的目的 片段,原核表达质粒pET-22 b(+)-TpN47经酶切鉴定正确,表达的蛋白约占菌体总蛋白的43
作者:王宪灵;张卫军;邹全明;曾明;罗萍;郭刚
来源:中国生物制品学杂志 2008 年 21卷 4期