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目的 克隆、表达并纯化梅毒螺旋体相对分子质量为47×103抗原,并检测梅毒患者的血清标本.方法 应用基因扩增技术分离此蛋白的全长基因,采用基因工程的方法,应用融合表达载体pGEX-2T,重组、克隆得到带有梅毒螺旋体47×103特异性抗原基因的重组菌株,经大肠杆菌表达系统获得重组融合蛋白.再经亲和层析获得纯品,并联合应用ELISA检测梅毒患者的血清标本30份,同时检测非梅毒患者的血清标本30份.结果 纯化后获得了梅毒螺旋体相对分子质量为47×103的特异性抗原.ELISA检测梅毒患者血清结果均阳性.非梅毒患者血清均阴性,无非特异性交叉反应.结论 此项方法具有操作简便、准确的特点,为临床检测梅毒开辟了新的领域.

作者:孙峥嵘;孙皓;鲁润铭;李鲁平;郑志红;李淑琴;张兆山

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2000 年 20卷 2期

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作者:
孙峥嵘;孙皓;鲁润铭;李鲁平;郑志红;李淑琴;张兆山
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2000 年 20卷 2期
标签:
梅毒螺旋体 特异性抗原 融合表达 基因表达
目的 克隆、表达并纯化梅毒螺旋体相对分子质量为47×103抗原,并检测梅毒患者的血清标本.方法 应用基因扩增技术分离此蛋白的全长基因,采用基因工程的方法,应用融合表达载体pGEX-2T,重组、克隆得到带有梅毒螺旋体47×103特异性抗原基因的重组菌株,经大肠杆菌表达系统获得重组融合蛋白.再经亲和层析获得纯品,并联合应用ELISA检测梅毒患者的血清标本30份,同时检测非梅毒患者的血清标本30份.结果 纯化后获得了梅毒螺旋体相对分子质量为47×103的特异性抗原.ELISA检测梅毒患者血清结果均阳性.非梅毒患者血清均阴性,无非特异性交叉反应.结论 此项方法具有操作简便、准确的特点,为临床检测梅毒开辟了新的领域.