目的 在毕赤酵母中表达重组人脑钠肽(BNP)与人血清白蛋白(HSA)融合蛋白,并检测其活性.方法 重叠PCR法拼接BNP二联体与HSA基因,插入表达载体pPIC9K,电穿孔法转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定及活性检测.结果 融合基因(BNP)2-HSA经测序正确,重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确.诱导72 h,融合蛋白表达量最高,可达200 mg/ml,且具有良好的反应原性,其活性为rhBNP标准品的1
作者:丁月娣;雷楗勇;陈蕴;张莲芬;金坚
来源:中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 3期