目的 建立检测无细胞百日咳疫苗(acellular pertussis vaccine,APV)中百日咳毒素(pertussistoxin,PT)活性的胎球蛋白结合试验ELISA方法.方法 优化APV中PT残余含量的胎球蛋白结合试验ELISA检测方法,分析不同抗原稀释液对该方法的影响,并对该方法进行线性、精密度、灵敏度、特异性验证.分析丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)、百日咳黏着素(pertactin,Prn)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT),破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)在成品疫苗剂量时(即50 μg/ml、16 μg/ml、25 Lf/ml、7Lf/ml)对PT与胎球蛋白结合的影响,确定疫苗解吸附条件,并对不同厂家的8批吸附无细胞百白破联合疫苗进行解析附后,检测PT含量,计算CV.结果 在胎球蛋白包被浓度为5 μg/ml时,使用pH8.5含1％胎牛血清白蛋白(BSA)Tris缓冲液对样品进行稀释后,直接用酶标抗PT抗体进行检测,建立的胎球蛋白结合试验ELISA检测方法的剂量反应曲线线性良好(r均＞0.99);试验内CV为13.74％ ～5.85％,试验间CV为2.75％～10.39％,灵敏度可达4 ng/ml,精密度好,灵敏度高;降低了PTd的干扰作用,特异性较好.FHA、Prn、DT、TT在成品疫苗剂量时对PT与胎球蛋白的结合无影响;确定疫苗解吸附条件为Tris-柠檬酸钠溶液(4％,w/v)(pH 8.5);各批疫苗3次检测结果的CV

作者：夏德菊；潘殊男；杨云凯；周第；金萧；王珣；张萍；肖詹蓉

来源：中国生物制品学杂志 2014 年 27卷 12期