目的 建立利用气相二氧化硅从人血浆中制备载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,apoA1)的方法,并对该方法的效果进行评价.方法 在人血浆中加入气相二氧化硅吸附apoA1,考察气相二氧化硅加入人血浆比例(m/V)及孵育时间对吸附的影响,确定最佳吸附条件.吸附后,离心分离人血浆与气相二氧化硅,再用不同浓度的乙醇溶液洗脱气相二氧化硅吸附的apoA1,确定乙醇溶液的最佳洗脱浓度.洗脱产物采用BCA法测定总蛋白浓度后,经SDS-PAGE,采用凝胶成像分析软件Bandscan 5.0分析apoA1纯度,并评价该方法制备apoA1的效率.结果 人血浆中加入1％(m/V)的气相二氧化硅时,apoA1提取效果最佳.气相二氧化硅与人血浆混合物孵育10 min,可完成对apoA1的饱和吸附.该混合物固液分离在大于12000×g的离心力条件下离心10 min,可获得最佳效果.洗脱液中乙醇最佳浓度为20％(V/V).在该洗脱条件下,可从1 mL人血浆中制备纯度为78.7％的apoA1 0.92 mg.结论 建立了利用气相二氧化硅从人血浆中制备apoA1的方法,该方法可简便高效地从人血浆中制备apoA1.
作者：李光飞；陶玲；王伟
来源：中国生物制品学杂志 2018 年 31卷 2期
