目的 建立重组人脑利钠肽等电点(isoelectric point,pI)分析的全柱成像毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing-whole column imaging detection,CIEF-WCID)法,并进行验证.方法 采用 CIEF-WCID法对两性电解质、占位剂、蛋白浓度、聚焦时间等进行优化后,获得检测重组人脑利钠肽的最佳检测条件.对建立的方法进行重复性、样品间精密度和耐用性验证,并对连续生产的3批重组人脑利钠肽进行pI分析.结果 选择HR AESlyte 8-10.5为两性电解质,25 mmol/L氢氧化钠为占位剂,以87.5μg/mL为样品检测终浓度,聚焦时间为8 min.同一样品连续进样6次,检测pI相对标准偏差(RSD)为0.1％;6份样品检测pIRSD为0.1％;在样品不同终浓度下,主峰pIRSD为0.1％,不同放置时间下,样品pIRSD为0.1％,但pI标记物不可随意更改.连续3批重组人脑利钠肽样品pI均可检出.结论 建立的重组人脑利钠肽pI分析的CIEF-WCID法,重复性好、精密度高,可用于重组人脑利钠肽后续的质量控制.
作者：张竞；周志艳；李丹丹；安丽康；王岩勃；邹卫
来源：中国生物制品学杂志 2023 年 36卷 5期
