目的 构建22型人类血小板抗原(HPA)基因分型参考品(质控DNA),并对其进行测序鉴定.方法 提取人血液基因组DNA,以其为模板,通过特异性引物扩增出各HPA(1a～16a)基因片段,胶回收后克隆至pUCm-T载体,随后转化E.coli DH5α,提取质粒酶切鉴定并测序;再以构建成功的HPA-1a～16a质粒为模板,通过定点突变获得HPA-1b～16bw基因片段,经克隆、转化后,作酶切鉴定并测序.结果 获得了HPA-1a～16a、HPA-1b～16bw基因片段,克隆出各型HPA基因分型参考品质粒,其序列与GenBank中公布的数据完全一致.结论 各型HPA基因分型参考品质粒的成功构建,解决了基因频率较低型别(HPA-1b～16bw)质控DNA难以获得的实际问题,为HPA基因分型方法的研究奠定了基础.
作者：安群星；李翠莹；陈蕤；陈晓鹏；穆士杰
来源：中国输血杂志 2011 年 24卷 5期
