目的 建立应用于HPA-1～ 17bw基因分型的多重聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对广西壮族人群HPA多态性分布进行调查.方法 设计多种HPA序列特异性引物的组合,在1个PCR反应体系中同时扩增多个HPA基因,根据扩增片断的有无和大小,指定相应的HPA基因型,并以17例国际合作研究项目提供的HPA参比DNA配组标本,以及100例已知HPA型的血小板供者的DNA标本作验证.使用验证后的技术对2659名无血缘关系的广西壮族人群展开PA-1～17bw的基因分型和抗原多态性研究.结果 建立了由16种PCR引物混合液,其中有6种多重PCR引物混合液组成的PCR-SSP反应体系,可用于HPA-1～17bw等位基因的检测.以HPA参比DNA配组标本,以及已知HPA型的供者的DNA标本的检测作验证,HPA分型结果完全一致;在2 659名广西壮族人群中各HPA等位基因频率分布为:HPA-1a和-1b为0.991 5和0.008 5,HPA-2a和-2b为0.956 9和0.043 1,HPA-3a和-3b为0.512 2和0.487 8,HPA-5a和-5b为0.985 0和0.015 0,HPA-6a和-6b为0.985 1和0.014 9,HPA-15a和-15b为0.5256和0.474 4;HPA-4、HPA-7～14bw、HPA-16～ 17bw只有a/a的纯合子;HPA-2～3、HPA-6bw以及HPA-15均存在a/a和b/b纯合子基因型个体.结论 多重PCR-SSP技术应用于HPA基因分型减少了PCR扩增反应数量,节省了人力、物

作者：申卫东；李丽兰；廖燕；赵桐茂；吴国光

来源：中国输血杂志 2014 年 27卷 1期