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目的 应用 CRISPR/Cas9 系统构建 BRCA1、BRCA2 和 CDH1 三基因乳腺特异性修饰小鼠模型.方法 针对小鼠BRCA1、BRCA2和CDH1基因分别设计并合成sgRNA,构建pX330-spCas9-U6-gRNA共表达载体,将共表达载体中CBh启动子替换为乳腺组织特异性启动子WAP.利用小鼠受精卵原核注射的方法制备转基因小鼠.结果 共注射受精卵190枚,得到活性受精卵130枚,移植4只受体鼠.产下F0代仔鼠42只,鉴定出11只转基因阳性小鼠,阳性率为26.19

作者:陈茜;向熙;杨漫漫;张婷婷;陈文彬;李林;魏强;李勇

来源:中国比较医学杂志 2018 年 28卷 8期

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作者:
陈茜;向熙;杨漫漫;张婷婷;陈文彬;李林;魏强;李勇
来源:
中国比较医学杂志 2018 年 28卷 8期
标签:
乳腺癌 CRISPR/Cas9系统 基因组编辑 基因敲除小鼠
目的 应用 CRISPR/Cas9 系统构建 BRCA1、BRCA2 和 CDH1 三基因乳腺特异性修饰小鼠模型.方法 针对小鼠BRCA1、BRCA2和CDH1基因分别设计并合成sgRNA,构建pX330-spCas9-U6-gRNA共表达载体,将共表达载体中CBh启动子替换为乳腺组织特异性启动子WAP.利用小鼠受精卵原核注射的方法制备转基因小鼠.结果 共注射受精卵190枚,得到活性受精卵130枚,移植4只受体鼠.产下F0代仔鼠42只,鉴定出11只转基因阳性小鼠,阳性率为26.19