目的 探究miR-433-3p在过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤中的作用及具体机制的研究.方法 构建氧化应激损伤模型,以H9c2心肌细胞为研究对象,通过转染miR-433-3p模拟物(miR-433-3p mimics)、miRNA阴性对照(miR-NC)、阴性对照(pcDNA-NC)和MAPK8过表达质粒(pcDNA-MAPK8)至H2 O2诱导的H9c2细胞中,将细胞分为对照组(Control),H2 O2模型组(H2 O2),H2 O2+miRNA阴性对照组(H2 O2+miR-NC),H2 O2+miR-433-3p模拟物组(H2 O2+miR-433-3p mimics),H2 O2+miR-433-3p模拟物+pcDNA阴性对照组(H2 O2+miR-433-3p mimics+pcDNA-NC)和H2 O2+miR-433-3p模拟物+MAPK8过表达组(H2 O2+miR-433-3p mimics+pcDNA-MAPK8).采用qRT-PCR法检测miR-433-3p和MAPK8在H9c2细胞中的mRNA表达水平.MTT法和ELISA试剂盒分别检测细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)释放量.Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、MAPK8和GAPDH的蛋白表达水平.双荧光素酶报告实验检测miR-433-3p与MAPK8之间的靶向关系.结果 与对照组相比,miR-433-3p在H2O2诱导的心肌细胞H9c2中低表达.相比较H2O2+miR-NC组,miR-433-3p过表达可以显著降低LDH释放量并增强细胞活力.此外,相比较H2 O2+miR-NC组,miR-433-3p过表达可以显著降低促凋亡蛋白Bax和Clea
作者:盛静宇;朱海根;王丽
来源:中国比较医学杂志 2021 年 31卷 8期