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目的:观察盐酸小檗碱(berberine,BBR)对缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞(NBK-52E)活性的影响.方法:应用化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)在NRK-52E细胞建立化学性缺氧再给氧损伤模型,模拟在体的缺血再灌注模型.以不同浓度(1×10-6,1×10-5,1×10-4 mol·L-1)的BBR处理NRK-52E细胞.应用四甲基偶氮唑法(MTT)检测BBR对各组细胞活性的影响;检测各组细胞上清液中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Hoechst33258染色观察各组凋亡细胞的形态学变化;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果:MTT结果显示1×10-4 mol·L-1BBR对细胞毒性作用明显,而1×10-6,1×10-5 mol·L-1BBR明显提高缺氧再给氧组细胞存活率,尤以1×10-5 mol·L-1为高;Hoechst33258显示正常组基本无凋亡细胞,模型组出现核大深染的凋亡细胞,而BBR(1×10-5 mol·L-1)预处理组凋亡细胞明显减少;与正常对照组相比,缺氧再给氧组细胞上清液中MDA含量明显升高(P<0.05).SOD活力显著降低(P<0.05).而用BBR预处理后缺氧再给氧组的MDA显著低于用药前(P<0.05),SOD则高于缺氧再给氧组(P<0.05),上述作用在BBR浓度为1 × 10-6~1×10-5 mol·L-1呈浓度依赖性.流式细胞仪结果显示1×10-5,1×10-6 mol·L-1BBR预处理后缺氧再给氧各组细胞凋亡

作者:张日东;白瑞苗;魏敬

来源:中国实验方剂学杂志 2011 年 17卷 4期

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作者:
张日东;白瑞苗;魏敬
来源:
中国实验方剂学杂志 2011 年 17卷 4期
标签:
盐酸小檗碱 细胞凋亡 肾小管上皮细胞 缺血再灌注
目的:观察盐酸小檗碱(berberine,BBR)对缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞(NBK-52E)活性的影响.方法:应用化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)在NRK-52E细胞建立化学性缺氧再给氧损伤模型,模拟在体的缺血再灌注模型.以不同浓度(1×10-6,1×10-5,1×10-4 mol·L-1)的BBR处理NRK-52E细胞.应用四甲基偶氮唑法(MTT)检测BBR对各组细胞活性的影响;检测各组细胞上清液中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Hoechst33258染色观察各组凋亡细胞的形态学变化;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果:MTT结果显示1×10-4 mol·L-1BBR对细胞毒性作用明显,而1×10-6,1×10-5 mol·L-1BBR明显提高缺氧再给氧组细胞存活率,尤以1×10-5 mol·L-1为高;Hoechst33258显示正常组基本无凋亡细胞,模型组出现核大深染的凋亡细胞,而BBR(1×10-5 mol·L-1)预处理组凋亡细胞明显减少;与正常对照组相比,缺氧再给氧组细胞上清液中MDA含量明显升高(P<0.05).SOD活力显著降低(P<0.05).而用BBR预处理后缺氧再给氧组的MDA显著低于用药前(P<0.05),SOD则高于缺氧再给氧组(P<0.05),上述作用在BBR浓度为1 × 10-6~1×10-5 mol·L-1呈浓度依赖性.流式细胞仪结果显示1×10-5,1×10-6 mol·L-1BBR预处理后缺氧再给氧各组细胞凋亡