为探讨金雀异黄素(genistein,gen)对氯化钴(CoCl2)诱导的人白血病细胞K562缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达的影响,本研究采用低氧模拟剂CoCl2模拟低氧环境.实验分为量-效关系组和时-效关系组,前者CoCl2取0、50、100及150 μmol/L4个浓度点,培养72小时进行检测;后者则在CoCl2取100μmol/L浓度的基础上,选取0、24、48和72小时4个时间点进行检测.gen干预实验分为:①正常对照组;②CoCl2 150 μmol/L组;③CoCl2 150 μmol/L加gen 50 μmol/L组;④CoCl2 150 μmol/L加gen 100 μmol/L;组⑤CoCl2 150 μmol/L加gen 200μmol/L组.培养72小时检测.采用RT-PCR及Western blot的方法分别检测HIF-1α mRNA及蛋白表达水平.结果发现:CoCl2诱导K562细胞HIF-1α蛋白的表达增加,并呈明显的浓度和时间依赖性关系(p<0.01);而对HIF-1α mRNA的表达无显著影响(p>0.05);gen呈明显浓度依赖性地抑制CoCl2诱导的K562细胞HIF-1α蛋白表达(p<0.01).对K562细胞HIF-1α mRNA表达无显著影响(p>0.05).结论:CoCl2呈浓度和时间依赖性诱导K562细胞HIF-1α蛋白的表达,无论常氧还是在CoCl2诱导下,HIF-1αmRNA呈组成型表达;gen可抑制CoCl2诱导的K562细胞HIF-1α的表达,这种抑制作用与mRNA水平无关,主要在蛋白水平.
作者:李国青;张育;沈维干;周玮;高娜;顾健
来源:中国实验血液学杂志 2008 年 16卷 1期