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目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达影响,分析在ATRA的作用下AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.方法:培养NB4细胞,用RT-PCR和Western blot技术分别检测1 μmol/L ATRA作用的NB4细胞在不同时间点的AnnexinⅡ表达.构建AnneixnⅡ启动子,用电转染将重组质粒pGL4.15-AnnexinⅡ-promoter瞬时转染NB4细胞,在24 h后用1μmol/L ATRA处理转染的NB4细胞,分析AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.结果:在转录水平,AnnexinⅡ的表达在48 h时逐渐下降;在蛋白水平,AnnexinⅡ的表达在24h开始下降,而在48 h时下降明显.同时通过ATRA作用AnnexinⅡ启动子,发现ATRA可使AnnexinⅡ启动子活性下降,且随时间的延长荧光素酶活性越来越弱.结论:ATRA可诱导NB4细胞中AnnexinⅡ下调;ATRA可使转染细胞NB4中Annexin启动子荧光素酶活性随时间的延长而逐渐减弱,本研究为深入探讨其分子机制奠定了基础.

作者:董小荣;闫金松;闫凡芝;赵佳

来源:中国实验血液学杂志 2016 年 24卷 4期

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作者:
董小荣;闫金松;闫凡芝;赵佳
来源:
中国实验血液学杂志 2016 年 24卷 4期
标签:
膜联蛋白Ⅱ NB4细胞 全反式维甲酸 启动子 annexin Ⅱ NB4 cell all-trans retinoic acid promoter
目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达影响,分析在ATRA的作用下AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.方法:培养NB4细胞,用RT-PCR和Western blot技术分别检测1 μmol/L ATRA作用的NB4细胞在不同时间点的AnnexinⅡ表达.构建AnneixnⅡ启动子,用电转染将重组质粒pGL4.15-AnnexinⅡ-promoter瞬时转染NB4细胞,在24 h后用1μmol/L ATRA处理转染的NB4细胞,分析AnnexinⅡ启动子的荧光素酶活性.结果:在转录水平,AnnexinⅡ的表达在48 h时逐渐下降;在蛋白水平,AnnexinⅡ的表达在24h开始下降,而在48 h时下降明显.同时通过ATRA作用AnnexinⅡ启动子,发现ATRA可使AnnexinⅡ启动子活性下降,且随时间的延长荧光素酶活性越来越弱.结论:ATRA可诱导NB4细胞中AnnexinⅡ下调;ATRA可使转染细胞NB4中Annexin启动子荧光素酶活性随时间的延长而逐渐减弱,本研究为深入探讨其分子机制奠定了基础.