目的:探讨中性粒细胞分离培养后细胞活力、凋亡、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)生成的变化.方法:采用密度梯度离心法分离健康人外周血中性粒细胞,在含10％胎牛血清的培养液于37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱中培养至96 h.应用流式细胞仪检测0、24、48、72和96 h的细胞活力、凋亡;在0、12、24和36 h检测ROS的生成.结果:中性粒细胞在体外培养24 h内,细胞活力可保持90％以上,24 h凋亡细胞比例与0h相比差异无统计学意义(P＞0.05),在体外培养72 h后细胞活力明显下降和细胞凋亡增加,在体外培养96 h细胞几乎全部死亡;中性粒细胞产生ROS的能力在12h已显著下降.结论:中性粒细胞在24 h内处于相对稳定的状态,细胞活力大于90％,凋亡细胞数变化不明显,可用于一般体外的实验研究.然而,中性粒细胞在体外培养12 h产生ROS的能力显著下降,ROS功能实验要在细胞分离后立即进行.
作者：李海宁；赵绍林；杨晋；李伟
来源：中国实验血液学杂志 2016 年 24卷 5期
