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目的:检测细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达水平,并探讨NK细胞对过表达SOCS3细胞系Jurkat细胞的杀伤作用.方法:采用RT-PCR技术检测20例ALL患儿及20例健康体检儿童(正常对照组)外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平.免疫磁珠分选健康人外周血NK细胞,采用流式细胞术检测其纯度.慢病毒载体感染Jurkat细胞使之过表达SOCS3,RT-PCR检测慢病毒感染后细胞中SOCS3 mRNA表达情况.将NK细胞与Jurkat细胞共培养,LDH释放法检测杀伤活性,ELISA检测TNF-α和IFN-γ浓度.流式细胞术检测过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB的表达.Western blot检测过表达SOCS3对Jurkat细胞中STAT3蛋白磷酸化水平的影响.结果:ALL患儿外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平较正常对照组显著降低.流式细胞术检测分离NK细胞纯度可达70%以上.慢病毒感染的Jurkat细胞中SOCS3 mRNA表达显著增加.过表达SOCS3的Jurkat细胞可显著促进NK细胞对其杀伤能力,且可上调NK细胞TNF-α和IFN-γ的分泌.流式细胞术检测结果显示,过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB表达水平均显著增加.Western blot结果显示,过表达SOCS3后可显著降低Jurkat细胞中JAK/STAT信号通路中STAT3蛋白的磷酸化水平.结论:在ALL

作者:唐冰;李永格;程琳;党惠兵

来源:中国实验血液学杂志 2022 年 30卷 2期

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作者:
唐冰;李永格;程琳;党惠兵
来源:
中国实验血液学杂志 2022 年 30卷 2期
标签:
急性淋巴细胞白血病;细胞因子信号传导抑制因子3;自然杀伤细胞;JAK/STAT信号通路
目的:检测细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS3)在急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达水平,并探讨NK细胞对过表达SOCS3细胞系Jurkat细胞的杀伤作用.方法:采用RT-PCR技术检测20例ALL患儿及20例健康体检儿童(正常对照组)外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平.免疫磁珠分选健康人外周血NK细胞,采用流式细胞术检测其纯度.慢病毒载体感染Jurkat细胞使之过表达SOCS3,RT-PCR检测慢病毒感染后细胞中SOCS3 mRNA表达情况.将NK细胞与Jurkat细胞共培养,LDH释放法检测杀伤活性,ELISA检测TNF-α和IFN-γ浓度.流式细胞术检测过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB的表达.Western blot检测过表达SOCS3对Jurkat细胞中STAT3蛋白磷酸化水平的影响.结果:ALL患儿外周血单个核细胞中SOCS3 mRNA表达水平较正常对照组显著降低.流式细胞术检测分离NK细胞纯度可达70%以上.慢病毒感染的Jurkat细胞中SOCS3 mRNA表达显著增加.过表达SOCS3的Jurkat细胞可显著促进NK细胞对其杀伤能力,且可上调NK细胞TNF-α和IFN-γ的分泌.流式细胞术检测结果显示,过表达SOCS3后Jurkat细胞表面NKG2D配体MICA与MICB表达水平均显著增加.Western blot结果显示,过表达SOCS3后可显著降低Jurkat细胞中JAK/STAT信号通路中STAT3蛋白的磷酸化水平.结论:在ALL