目的本研究应用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)方法抑制COPS3基因表达,分析其对肺癌细胞增殖的影响并探讨其相关机制,以期初步阐明COPS3基因在肺癌发展中的作用.方法以肺癌细胞株A549为研究对象,分别将携带有COPS3基因siRNA (SmallinterferingRNA)序列的慢病毒载体(siCOPS3)和携有无关序列的对照载体感染A549细胞株,应用实时定量PCR(realtimePCR,RTPCR)和westernblot方法分析COPS3mRNA及蛋白表达水平;BrdU法分析细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化与细胞凋亡情况.结果成功构建了COPS3慢病毒RNAi载体,并成功感染A549细胞;与对照组相比,感染有siCOPS3的细胞COPS3mRNA及蛋白表达水平均显著下降,细胞增殖受抑制,细胞凋亡增加;大部分细胞周期滞于G0/G1期.结论下调COPS3基因水平可以抑制肺癌细胞增殖并促进其凋亡.COPS3慢病毒RNAi的建立为进一步研究COPS3的功能奠定了基础.
作者：孔庆彧；崔久嵬；于得海；李薇；王雪梅；王冠军
来源：中国实验诊断学 2012 年 9期
