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目的 探讨基于TaqMan探针的幽门螺杆菌23S rDNA基因片段的实时荧光定量PCR检测的有效方法.方法 根据幽门螺杆菌23S rDNA序列设计引物和探针,构建质粒标准品,建立实时荧光定量PCR体系并进行方法学评价,并对2012年5月至10月收集的100份临床样本进行检测同时应用免疫组化及银染方法进行比较分析.结果 建立了检测23S rDNA的实时荧光定量PCR方法:107-102copies/ul范围内均有"S"型扩增曲线,最低检测浓度为102copies/ul,标准曲线相关系数为1.对临床其它消化道病原体不出现特异性的扩增曲线.对100份样本进行检测,实时荧光定量PCR能检出31份阳性,而免疫组化方法能检出25份阳性,银染方法能检出28份阳性.结论 实时荧光定量PCR方法可成功检测幽门螺杆菌,且该方法具有灵敏度和特异性高及重复性好等优点.

作者:石建玲;程波;刘珊;吴西钊;权兰菊;丁姗姗;孙锁柱

来源:中国实验诊断学 2013 年 17卷 6期

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作者:
石建玲;程波;刘珊;吴西钊;权兰菊;丁姗姗;孙锁柱
来源:
中国实验诊断学 2013 年 17卷 6期
标签:
幽门螺杆菌 实时荧光定量PCR 23S rDNA
目的 探讨基于TaqMan探针的幽门螺杆菌23S rDNA基因片段的实时荧光定量PCR检测的有效方法.方法 根据幽门螺杆菌23S rDNA序列设计引物和探针,构建质粒标准品,建立实时荧光定量PCR体系并进行方法学评价,并对2012年5月至10月收集的100份临床样本进行检测同时应用免疫组化及银染方法进行比较分析.结果 建立了检测23S rDNA的实时荧光定量PCR方法:107-102copies/ul范围内均有"S"型扩增曲线,最低检测浓度为102copies/ul,标准曲线相关系数为1.对临床其它消化道病原体不出现特异性的扩增曲线.对100份样本进行检测,实时荧光定量PCR能检出31份阳性,而免疫组化方法能检出25份阳性,银染方法能检出28份阳性.结论 实时荧光定量PCR方法可成功检测幽门螺杆菌,且该方法具有灵敏度和特异性高及重复性好等优点.