目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）基因转染大鼠内皮祖细胞的方法，分析转染 VEGF 基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化，采取 FITC-UEA-I 和 Dil-Ac-LDL 双染色法验证；采用腺病毒包装 VEGF165基因，按照不同比例转染内皮祖细胞后，通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率；以未转染及转染空载体为对照；采用 MTT 法验证转染 VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响；采用 ELISA 法检测转染后细胞培养上清中的 VEGF 含量。结果分离诱导的大鼠内皮祖细胞分化良好，FITC-UEA-I 及 Dil-Ac-LDL 均呈阳性；按照细胞病毒比1：50转染内皮祖细胞的转染效率最高，且细胞状态不受影响；转染 VEGF165基因的内皮祖细胞能分泌大量的 VEGF，提高培养上清液中的总 VEGF 水平，其增殖能力也明显强于空质粒转染组和未转染组。结论通过腺病毒载体转染 VEGF165基因可以促进内皮祖细胞分泌 VEGF，提高内皮祖细胞的增殖能力。
作者：王伟；刘德红；李卓成；罗蓉；许长琼；杨自华
来源：中国实验诊断学 2015 年 3期
