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目的 探讨慢病毒介导血管内皮生长因子165(VEGF165)转染的内皮祖细胞(EPCs)移植在大鼠急性肺损伤(ALI)中的保护作用.方法 分离培养雄性SD大鼠单核细胞获得EPCs备用.构建携带人VEGF165基因的慢病毒载体.按随机数字表法将90只雄性SD大鼠分为ALI模型组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EPCs干预组、空载质粒EPCs干预组、VEGF165转染EPCs干预组,每组再分为4、12、48 h 3个时间点亚组,每个亚组6只.经尾静脉注射0.15 μL/g油酸建立大鼠ALI模型;各干预组经尾静脉相应给予PBS、EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs各0.2 mL(含细胞数1×106).分别于各时间点取大鼠腹主动脉血进行血气分析;取左肺组织计算肺湿/干重比值(W/D),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)、VEGF165表达;苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分.结果 与ALI模型组比较,EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs治疗组4 h开始动脉血氧分压(PaO2)明显升高,肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达均明显下降,VEGF165表达明显升高.与EPCs干预组比较,VEGF165转染EPCs干预组PaO2升高、肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达下降、以及VEGF165表达升高均随时间延长更加显著〔4 h:PaO2(mmHg,1 mmHg=0.133

作者:何招辉;贺慧为;卢院华;陈志;徐芳华;王荣胜;杨春丽

来源:中华危重病急救医学 2017 年 29卷 11期

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作者:
何招辉;贺慧为;卢院华;陈志;徐芳华;王荣胜;杨春丽
来源:
中华危重病急救医学 2017 年 29卷 11期
标签:
血管内皮生长因子 内皮祖细胞 急性肺损伤 慢病毒 细胞转染 Vascular endothelial growth factor Endothelial progenitor cell Acute lung injury Lentivirus Cell transfection
目的 探讨慢病毒介导血管内皮生长因子165(VEGF165)转染的内皮祖细胞(EPCs)移植在大鼠急性肺损伤(ALI)中的保护作用.方法 分离培养雄性SD大鼠单核细胞获得EPCs备用.构建携带人VEGF165基因的慢病毒载体.按随机数字表法将90只雄性SD大鼠分为ALI模型组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EPCs干预组、空载质粒EPCs干预组、VEGF165转染EPCs干预组,每组再分为4、12、48 h 3个时间点亚组,每个亚组6只.经尾静脉注射0.15 μL/g油酸建立大鼠ALI模型;各干预组经尾静脉相应给予PBS、EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs各0.2 mL(含细胞数1×106).分别于各时间点取大鼠腹主动脉血进行血气分析;取左肺组织计算肺湿/干重比值(W/D),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)、VEGF165表达;苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分.结果 与ALI模型组比较,EPCs、空载质粒EPCs和VEGF165转染EPCs治疗组4 h开始动脉血氧分压(PaO2)明显升高,肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达均明显下降,VEGF165表达明显升高.与EPCs干预组比较,VEGF165转染EPCs干预组PaO2升高、肺W/D比值及肺组织iNOS和ET-1表达下降、以及VEGF165表达升高均随时间延长更加显著〔4 h:PaO2(mmHg,1 mmHg=0.133