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目的 构建6种分别携带GJB2基因错义突变A40G、V371、L90P、L90V、V84L和W44C的真核表达载体,转染HEK293细胞.建立6种错义突变的稳定表达细胞系.方法 以野生型Cx26-EGFP融合蛋白质粒为模板,用Stratagene公司定点突变试剂盒构建错义突变表达载体,直接测序鉴定序列正确性,选取含有突变的载体转染HEK293细胞,G418选择性培养2周,流式细胞仪筛选表达阳性细胞,扩增培养形成稳定表达人Cx26突变的HEK293细胞系.培养细胞用4

作者:张延平;汤文学;常青;Shoeb Ahamad;林曦

来源:中国听力语言康复科学杂志 2008 年 4期

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作者:
张延平;汤文学;常青;Shoeb Ahamad;林曦
来源:
中国听力语言康复科学杂志 2008 年 4期
标签:
缝隙连接26 错义突变 载体 基因表达
目的 构建6种分别携带GJB2基因错义突变A40G、V371、L90P、L90V、V84L和W44C的真核表达载体,转染HEK293细胞.建立6种错义突变的稳定表达细胞系.方法 以野生型Cx26-EGFP融合蛋白质粒为模板,用Stratagene公司定点突变试剂盒构建错义突变表达载体,直接测序鉴定序列正确性,选取含有突变的载体转染HEK293细胞,G418选择性培养2周,流式细胞仪筛选表达阳性细胞,扩增培养形成稳定表达人Cx26突变的HEK293细胞系.培养细胞用4