目的 探讨Ghrelin对人胚胎干(hES)细胞定向分化为心肌细胞的影响. 方法 以不同浓度Ghrelin诱导hES细胞定向分化为心肌细胞,显微镜下计数搏动细胞团的比例,应用实时PCR检测心肌特异性标志物的表达.应用RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色检测分化细胞中生长激素促分泌物受体1α(GHSR1α)的表达,添加GHS-R1α拮抗剂[D-lys3]-GHRP-6,观察其对Ghrelin促分化作用的影响. 结果 与对照组比较,10-10、10-9及10-8 mol/L Ghrelin均可增加搏动细胞团的比例[搏动比例分别为(12.9±1.4)％％,(19.5±2.2)％及(13.5±3.1)％vs(10.3±2.2)％,P＜0.05].RT-PCR分析显示,Ghrelin可上调α-肌球蛋白重链(α-MHC)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达[α-MHC:100％ vs (40.1±13.2)％,P＜0.001;cTnI:100％ vs (52.6±9.8)％,P＜0.001].RT-PCR、Western blot及免疫荧光染色均显示GHS-R1α在不同阶段的分化细胞中表达,但酰基化和非酰基化Ghrelin的促分化作用相似,且添加GHS-R1α拮抗剂不能阻断Ghrelin的促分化作用. 结论 Ghrelin可促进hES细胞定向分化为心肌细胞,该作用可能由GHS-R1α以外的信号途径所介导.
作者：魏蕊；杨进；洪天配；高美娟；侯文芳；刘国强；张琳；王海宁；高洪伟
来源：中国糖尿病杂志 2014 年 22卷 8期
