目的:摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(Mesc)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法.方法:研究Mesc不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导其向心肌细胞分化,比较两种培养体系对EB心肌细胞分化潜能的影响,通过免疫荧光染色及RT-PCR对ESC来源的心肌细胞进行鉴定.结果:当Mesc接种密度为1×10~5～3×10~5个/ml,搅拌速度设定为15～30r/min时,搅拌式生物反应器能高效制备出大量相对均一的EB,EB中几乎没有坏死细胞.与细菌培养皿制备的EB相比,生物反应器培养的EB向心肌细胞分化的效率更高,并表达心肌特异性基因.结论:搅拌式生物反应器培养促进EB的形成及其向心肌细胞分化,是一种更为理想的EB培养系统.#0;EB为对照,用抗坏血酸诱导其向心肌细胞分化,比较两种培养体系对EB心肌细胞分化潜能的影响,通过免疫荧光染色及RT-PCR对ESC来源的心肌细胞进行鉴定.结果:当Mesc接种密度为1×10~5～3×10~5个/ml,搅拌速度设定为15～30r/min时,搅拌式生物反应器能高效制备出大量相对均一的EB,E#0;中几乎没有坏死细胞.与细菌培养皿制备的EB相比,生物反应器培养的EB向心肌细胞分化的效率更高,并表达心肌特异性基因.结论:搅拌式生物反应器培养促进
作者：何文俊；叶玲玲；李世崇；刘红；王启伟；王海涛；谢靖；陈昭烈
来源：中国生物工程杂志 2009 年 29卷 11期
