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目的:利用经典的悬滴培养法形成拟胚体(EBs),诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)在体外分化为心肌细胞,观察维生素C作为诱导剂对mESCs体外诱导分化为心肌细胞的影响,进而寻找一种高效、安全的诱导方法.方法:复苏mESCs,传代培养后,利用悬滴法使mESCs形成拟胚体,用含0.1mg/mL维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,以不添加任何诱导剂作为对照组,观察出现搏动拟胚体的时间,搏动拟胚体的数量,计算分化比率,统计搏动频率,并进行免疫荧光染色测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达.结果:小鼠胚胎干细胞可自发分化为心肌细胞,但效率较低,0.1mg/mL的维生素C能明显提高mESCs分化为心肌细胞的效率,约83.3%的EBs出现搏动,显著高于未添加任何诱导剂组,搏动频率为(81.2±7.8)次/分钟.两组搏动心肌细胞cTnT免疫染色阳性.结论:维生素C能够显著提高mESCs向心肌细胞分化效率,应用维生素C体外诱导mESCs向心肌细胞分化是一种较为理想的体外诱导方式.

作者:许士俊;穆军升;张建群;伯平

来源:心肺血管病杂志 2015 年 34卷 10期

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作者:
许士俊;穆军升;张建群;伯平
来源:
心肺血管病杂志 2015 年 34卷 10期
标签:
维生素C 小鼠胚胎干细胞 心肌细胞 细胞分化 Ascorbic acid Mouse embryonic stem cells Cardiomyocyte Induced differentiation
目的:利用经典的悬滴培养法形成拟胚体(EBs),诱导小鼠胚胎干细胞(mESCs)在体外分化为心肌细胞,观察维生素C作为诱导剂对mESCs体外诱导分化为心肌细胞的影响,进而寻找一种高效、安全的诱导方法.方法:复苏mESCs,传代培养后,利用悬滴法使mESCs形成拟胚体,用含0.1mg/mL维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,以不添加任何诱导剂作为对照组,观察出现搏动拟胚体的时间,搏动拟胚体的数量,计算分化比率,统计搏动频率,并进行免疫荧光染色测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达.结果:小鼠胚胎干细胞可自发分化为心肌细胞,但效率较低,0.1mg/mL的维生素C能明显提高mESCs分化为心肌细胞的效率,约83.3%的EBs出现搏动,显著高于未添加任何诱导剂组,搏动频率为(81.2±7.8)次/分钟.两组搏动心肌细胞cTnT免疫染色阳性.结论:维生素C能够显著提高mESCs向心肌细胞分化效率,应用维生素C体外诱导mESCs向心肌细胞分化是一种较为理想的体外诱导方式.