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目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)对腹膜间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌细胞腹膜转移的影响。方法 TGF-β1作用人腹膜间皮细胞系HMrSV5,倒置显微镜下观察间皮细胞形态学变化。采用Western-blot检测上皮细胞表型蛋白(细胞角蛋白和E-钙黏素)、间皮细胞表型蛋白(α-SMA和弹性蛋白)及Smad2蛋白水平的表达情况。采用黏附试验观察表型转化间皮细胞对胃癌细胞系HSC-39黏附的影响。间皮细胞(8×104/孔)与胃癌细胞系HSC-39(4×104/孔)共培养,采用体外Transwell侵袭实验观察腹膜微环境变化对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果 TGF-β1作用腹膜间皮细胞24 h后部分细胞转变为狭长型,72 h后间皮细胞转变为典型纤维细胞样外观。TGF-β1作用间皮细胞可诱导弹性蛋白和α-SMA表达上调,细胞角蛋白和 E-钙黏素表达下降,并且呈现时间依赖性变化(P<0.05)。 TGF-β1作用15 min后,间皮细胞内磷酸化Smad2表达开始升高,30 min达到顶峰,较对照组增加432%(P<0.01);但总Smad2表达则无明显变化(P>0.05)。 TGF-β1作用72 h后,间皮细胞与HSC-39胃癌细胞的黏附率较对照组增加(146±17)%(P<0.05)。胃癌细胞与TGF-β1刺激的间皮细胞共培养48 h后,平均每视野转移癌细胞数目为61.1±11

作者:吕志栋;孔滨;刘相萍;李福年;王海波;徐惠绵

来源:中华胃肠外科杂志 2015 年 1期

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作者:
吕志栋;孔滨;刘相萍;李福年;王海波;徐惠绵
来源:
中华胃肠外科杂志 2015 年 1期
标签:
胃肿瘤 上皮-间质转化 间皮细胞 转化生长因子β1 Stomach neoplasms Epithelial-mesenchymal transition Mesothelial cells Transforming growth factor-beta1
目的:观察转化生长因子β1(TGF-β1)对腹膜间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌细胞腹膜转移的影响。方法 TGF-β1作用人腹膜间皮细胞系HMrSV5,倒置显微镜下观察间皮细胞形态学变化。采用Western-blot检测上皮细胞表型蛋白(细胞角蛋白和E-钙黏素)、间皮细胞表型蛋白(α-SMA和弹性蛋白)及Smad2蛋白水平的表达情况。采用黏附试验观察表型转化间皮细胞对胃癌细胞系HSC-39黏附的影响。间皮细胞(8×104/孔)与胃癌细胞系HSC-39(4×104/孔)共培养,采用体外Transwell侵袭实验观察腹膜微环境变化对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果 TGF-β1作用腹膜间皮细胞24 h后部分细胞转变为狭长型,72 h后间皮细胞转变为典型纤维细胞样外观。TGF-β1作用间皮细胞可诱导弹性蛋白和α-SMA表达上调,细胞角蛋白和 E-钙黏素表达下降,并且呈现时间依赖性变化(P<0.05)。 TGF-β1作用15 min后,间皮细胞内磷酸化Smad2表达开始升高,30 min达到顶峰,较对照组增加432%(P<0.01);但总Smad2表达则无明显变化(P>0.05)。 TGF-β1作用72 h后,间皮细胞与HSC-39胃癌细胞的黏附率较对照组增加(146±17)%(P<0.05)。胃癌细胞与TGF-β1刺激的间皮细胞共培养48 h后,平均每视野转移癌细胞数目为61.1±11