目的:探讨miR-200a对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响.方法:体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),TGF-β1(终浓度为10 ng/mL)作用12、24、48 h,采用qPCR检测miR-200a的表达,qPCR和Western Blot检测上皮转分化相关蛋白E-cadherin和α-SMA的mRNA和蛋白表达;用agomir和antagomir分别转染细胞,其中转染agomir后用TGF-β1诱导肾小管上皮细胞,qPCR、Western Blot和细胞免疫荧光检测E-cadherin和α-SMA的mRNA和蛋白表达情况.结果:在TGF-β1诱导下miR-200a的表达随着时间逐渐降低(P<0.05),E-cadherin表达呈降低趋势(P<0.05),α-SMA表达逐步上调(P<0.05);agomir使miR-200a表达明显升高(P<0.05),antagomir使miR-200a表达降低(P<0.05);与转染NC-miRNA相比,agomir在mRNA和蛋白水平上调E-cadherin的表达(P<0.05),下调α-SMA的表达(P<0.05);antagomir则抑制E-cadherin的表达(P<0.05),增加α-SMA的表达(P<0.05),细胞免疫荧光表达情况与蛋白水平相符.结论:miR-200a能减弱TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化.
作者:龚艺;周宝尚;陈华;张璟
来源:中国临床药理学与治疗学 2016 年 21卷 2期