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目的 观察瘦素(LP)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其诱导转分化的机制.方法 不同浓度LP(10、50、100 ng/ml)刺激体外培养的HK-2细胞,以及LP作用不同时间(24、48、72 h)进行分组,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;RT-PCR法和Western blot法检测细胞α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、FN的表达水平;ELISA法检测上清中TGF-β1蛋白表达量.抗TGF-β1抗体中和实验分析LP对HK-2细胞转分化及与TGE-β1的关系.结果 (1)LP可使HK-2细胞逐渐由椭圆形变成长梭形,类似肌成纤维细胞的形态;(2)LP可下调E-cadherin的表达,同时上调α-SMA、TGF-β1的表达,其作用呈一定的剂量及时间依赖性;(3)抗TGF-β1抗体能够逆转LP诱导的转分化作用.结论 LP通过诱导HK-2细胞发生转分化,参与肾间质纤维化的发生发展,其作用机制与上调TGF-β1的表达有关.

作者:刘丽秋;傅文;徐晶;宋起;周丽敏

来源:中国糖尿病杂志 2014 年 22卷 3期

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作者:
刘丽秋;傅文;徐晶;宋起;周丽敏
来源:
中国糖尿病杂志 2014 年 22卷 3期
标签:
瘦素 肾小管 上皮细胞 上皮细胞-间充质转分化 转化生长因子-β1 Leptin Kidney tubules Epithelial cells Epithelial-mesenchymal transition Transforming growth factor beta 1
目的 观察瘦素(LP)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其诱导转分化的机制.方法 不同浓度LP(10、50、100 ng/ml)刺激体外培养的HK-2细胞,以及LP作用不同时间(24、48、72 h)进行分组,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;RT-PCR法和Western blot法检测细胞α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、FN的表达水平;ELISA法检测上清中TGF-β1蛋白表达量.抗TGF-β1抗体中和实验分析LP对HK-2细胞转分化及与TGE-β1的关系.结果 (1)LP可使HK-2细胞逐渐由椭圆形变成长梭形,类似肌成纤维细胞的形态;(2)LP可下调E-cadherin的表达,同时上调α-SMA、TGF-β1的表达,其作用呈一定的剂量及时间依赖性;(3)抗TGF-β1抗体能够逆转LP诱导的转分化作用.结论 LP通过诱导HK-2细胞发生转分化,参与肾间质纤维化的发生发展,其作用机制与上调TGF-β1的表达有关.